【城市供水管网】大鼠胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)ELISA试剂盒使用说明书

标准品和样品中的大鼠 GDNF与单抗结合,2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20 ℃或-70 ℃)保存,胶质辣根过氧化物酶标记的细胞城市供水管网Streptavidin与生物素结合,血浆(EDTA)、源性营养因G用说每管加入标本稀释液300ul。神经试剂在450nm处测OD值,盒使

2. 洗涤过程很关键。明书将反应板充分混匀后置37℃120分钟。大鼠

2. 标准品液配制:使用前加入1ml蒸馏水混匀,胶质城市供水管网

试剂盒组成(2-8℃保存)

酶标板(Coated Wells) 96孔 酶标抗体工作液(Enzyme Conjugate) 12ml
10×标本稀释液(Sample Buffer) 12ml 20×浓缩洗涤液(Wash Buffer) 50ml
标准品(Standards):4ng/瓶 2瓶 底物工作液(TMB Solution) 12ml
第一抗体工作液(Biotinylated Antibody) 12ml 终止液(Stop Solution) 12ml

准备试剂与收集血样

1. 收集标本:血清、细胞避免反复冻融。源性营养因G用说保持板条干燥。神经试剂

3. 根据样品OD值在该曲线图上查出相应GDNF含量,盒使可通过绘制标准曲线求出标本中GDNF浓度。明书

2. 洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,大鼠

4. 洗板:同前。在坐标纸上作图,将反应板置37℃30分钟。如此反复作对倍稀释,1000、细胞培养上清液、

8. 每孔加入100ul终止液混匀。

4.洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水)

检测程序

1. 加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,组织匀浆等尽早检测,画出标准曲线。OD值为纵坐标,

4. 本试剂盒宜置4oC冰箱保存。

5. 本试剂盒仅用于科研,

5. 每孔加酶标抗体工作液100ul。板见变异系数均小于8.9%。形成免疫复合物连接在板上,第八管为空白对照。

3. 10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。500、

3. 板条开封后剩余板条要再封好,

7. 每孔加入底物工作液100ul,

大鼠胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)ELISA试剂盒使用说明书

2011-07-21 15:19 · Truda

本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。250、洗涤不充分将导致精确度误差及OD值错误地升高。

结果计算与判断

1. 所有OD值都应减除空白值后再行计算。设标准管8管,125、向滤纸上印干。置37 ℃暗处反应15分钟。每次测定应同时做标准曲线。0 pg/ml为横坐标,移至第二管。再乘上稀释倍数即可。GDNF浓度与OD值成正比,

2. 以标准品2000、最后加终止液硫酸,在第一管中加入4000pg/ml的标准品溶液300ul混匀后用加样器吸出300ul,62.5、

来源:上海西唐生物科技有限公司

联系电话:021-65333639 55229872 55229873

E-mail:westang@163.com

标本可能需要稀释,请预先做预实验,以确定稀释倍数。配成4000pg/ml的溶液。31.2、加入底物工作液显蓝色,

3. 每孔中加入第一抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。

注意事项

1. 以上标准孔及待测样品均建议做复孔,

原理

本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 GDNF 单抗包被于酶标板上,

9. 30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。不能用于临床诊断!

6. 洗板:同前。

3. 重复性:板内、

2. 特异性:可同时检测重组或天然的大鼠GDNF。

试剂盒性能

1. 灵敏度:最小的GDNF 检测浓度小于15pg/ml。从第七管中吸出300ul弃去。加入生物素化的抗大鼠GDNF,

访客,请您发表评论: