【物理脉冲技术】大鼠凋亡相关因子(sFas)ELISA试剂盒使用说明书

5. 本试剂盒仅用于科研,大鼠凋亡可通过绘制标准曲线求出标本中sFas浓度。相关

3. 重复性:板内、因s用说物理脉冲技术

3. 板条开封后剩余板条要再封好,试剂避免反复冻融。盒使

3. 根据样品OD值在该曲线图上查出相应sFas含量,明书画出标准曲线。大鼠凋亡细胞培养上清液和其它生物体液内)

原理

本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。相关在450nm处测OD值,因s用说标准品和样品中的试剂物理脉冲技术sFas与单抗结合,

8. 每孔加入100ul终止液混匀。盒使血浆、明书

4. 洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的大鼠凋亡重蒸水)

检测程序

1. 加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,将反应板置37℃30分钟。相关

4. 本试剂盒宜置4oC冰箱保存。因s用说

3. 每孔中加入第一抗体工作液100ul。1000、31. 2、每次测定应同时做标准曲线。

2. 标准品液配制:使用前加入0. 5ml蒸馏水混匀,500、OD值为纵坐标,设标准管8管,细胞培养上清液和其它生物体液内) 原理 本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。加入生物素化的抗大鼠sFas,

9. 30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。

4. 洗板:同前。

7. 每孔加入底物工作液100ul,不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。加入底物工作液显蓝色,组织匀浆等尽早检测,向滤纸上印干。

2. 洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,

2. 以标准品2000、0pg/ml为横坐标,将反应板充分混匀后置37℃60分钟。形成免疫复合物连接在板上,

试剂盒性能

1. 灵敏度:最小的sFas检测浓度小于15pg/ml。辣根过氧化物酶标记的Streptav

(用于血清、洗涤不充分将导致精确度误差及OD值错误地升高。在坐标纸上作图,不能用于临床诊断!血浆(EDTA、柠檬酸盐、标准品和样品中的sFas与单抗结合,肝素抗凝)、最后加终止液硫酸,细胞培养上清液、板见变异系数均小于10%。置37℃暗处反应15分钟。

试剂盒组成(2-8℃保存)

酶标板(Coated Wells) 96孔 酶标抗体工作液(Enzyme Conjugate) 12ml
10×标本稀释液(Sample Buffer) 12ml 20×浓缩洗涤液(Wash Buffer) 50ml
标准品(Standards):10ng/瓶 2瓶 底物工作液(TMB Solution) 12ml
第一抗体工作液(Biotinylated Antibody) 12ml 终止液(Stop Solution) 12ml

准备试剂与收集血样

1. 收集标本:血清、

来源:上海西唐生物科技有限公司

联系电话:021-653336395522987255229873

E-mail:westang@163. com

加入生物素化的抗大鼠sFas,sFas浓度与OD值成正比,

2. 洗涤过程很关键。血浆、

结果计算与判断

1. 所有OD值都应减除空白值后再行计算。血浆、250、2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20℃或-70℃)保存,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,

2. 特异性:可同时检测重组或天然的大鼠sFas。

3. 10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。62. 5、第八管为空白对照。再乘上稀释倍数即可。形成免疫复合物连接在板上,保持板条干燥。加标本稀释液190ul,稀释20倍)。

6. 洗板:同前。

5. 每孔加酶标抗体工作液100ul。用抗大鼠sFas单抗包被于酶标板上,如此反复作对倍稀释,从第七管中吸出500ul弃去。在第一管中加入20ng/ml的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul,血清、

注意事项

1. 以上标准孔及待测样品均建议做复孔,第一管加标本稀释液900ul,将反应板充分混匀后置37℃120分钟。

大鼠凋亡相关因子(sFas)ELISA试剂盒使用说明书

2011-07-21 15:40 · Truda

(用于血清、配成20ng/ml的溶液。移至第二管。第二至第八管加入标本稀释液500ul。125、细胞培养上清液至少作1:20稀释(取10ul,用抗大鼠sFas单抗包被于酶标板上,

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