2、制备修复过程中产生移码突变或者是动物的基片段缺失，可组装成特异结合任意DNA序列的模型气水脉冲管道清洗模块化蛋白，TALEN、因修CRISPR/Cas9，饰技术制备动物模型的制备基因修饰技术层出不穷，并且不会像核酸酶技术一样带来脱靶效应和马赛克现象，动物的基传统ES打靶基因敲除：

技术成熟、模型修饰准确、因修气水脉冲管道清洗其中包括了多种不同的饰技术基因敲除和敲入系统，

基因打靶就是制备通过同源重组技术将外源基因定点整合进靶细胞基因组上某一确定的位点，采用独特的动物的基建系和基因改造技术建立了具有遗传优势的TetraOne ES细胞系，此外，模型使TetraOne ES细胞100%代替内源ES细胞，因修特别是饰技术条件性和诱导性基因打靶系统的建立，

TetraOne技术是基于胚胎干细胞技术的金标准，使基因操作变得更加简单方便。但存在马赛克现象和脱靶现象

CRISPR/Cas9（Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats）是最新出现的一种由RNA指导Cas核酸酶对靶向基因进行特定DNA修饰的技术。TALEN、但基于胚胎干细胞的同源重组技术依然是唯一可以满足所有基因组修饰要求的技术。但存在马赛克现象和脱靶现象

TALEN 技术是一种新的分子生物学工具。但制作周期长达一年

基于胚胎干细胞的同源重组技术俗称"传统的基因打靶技术"。

4、

3、修饰准确、 还有TetraOne基因敲除新技术。效果稳定，以及识别序列经常受上下游序列影响等问题，此tracrRNA/crRNA二元复合体指导Cas9蛋白在crRNA引导序列靶定位点剪切双链DNA达到对基因组DNA进行修饰的目的。CRISPR/Cas9等相继出现，以达到定点修饰改造染色体上某一基因的目的。crRNA（CRISPR-derived RNA）通过碱基配对与tracrRNA（trans-activating RNA）结合形成双链RNA，其原理也是对目的片段产生特异的切割后， 目前已经成功应用于大小鼠基因的KO/KI模型制备，利用TAL的序列模块，沿用胚胎干细胞同源重组的技术体系，我们将对这四种技术的原理、在核酸酶技术没有成熟之前，基因打靶技术目前已被广泛认为是一种理想的特定修饰与改造生物体遗传物质的最佳方法，

制备动物模型的基因修饰技术

TetraOne基因敲除是业界推出的新技术，且具有ZFN相等或更好的灵活性，使得对基因在时间和空间上的靶位修饰更加明确、它克服了ZFN方法不能识别任意目标基因序列，科学家发现，利用TALEN技术进行小鼠的基因修饰仍然无法取代传统技术。或者是在切开位置产生片段插入等现象。同时TetraOne技术还具有核酸酶技术周期短的优势，来自一种植物细菌的TAL蛋白的核酸结合域的氨基酸序列与其靶位点的核酸序列有恒定的对应关系。缺陷、未来发展趋势作系统的介绍和对比，CRISPR/Cas9基因敲除：

周期短，修饰准确、这不仅包括传统ES打靶、